Der Ortsverband Hildesheim wurde im Jahr 1953 als einer der ersten Ortsverbände Südniedersachsens gegründet. Neben den klassischen Aufgaben der Johanniter-Unfall-Hilfe wie Rettungsdienst, Krankentransport, dem Katastrophen- und Bevölkerungsschutz, der sanitätsdienstlichen Absicherung bei Veranstaltungen und der Breitenausbildung leisten die Johanniter in Hildesheim auch Integrationsarbeit, sind ein Standort des Ärztlichen Bereitschaftsdienstes in Niedersachsen und bieten den Hausnotrufeinsatzdienst an. Eine Motorradstaffel, eine Drohnenstaffel und eine Johanniter Jugend, sowie Servicewohnprojekte runden das Angebot des Ortverbandes ab. Des Weiteren betreiben die Johanniter die Kita Ostendkinder in der Goslarschen Landstraße, die Betriebskrippe des Landkreises „Die Landkreis-Lütten“ und in Sarstedt die Krippe Kleeblätter. Im Argentum am Ried in Sarstedt und im Bernwardshof in Hildesheim sind die Johanniter für Servicewohnprojekte zuständig.